货号：C1008A
规格：100ml
保存：-20℃保存， 12 个月有效。
产品简介：
高效 RIPA 裂解液(RIPA Lysis Buffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液。本产品含有含 PMSF（100mM,1ml ），RIPA 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE、Western、免 疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和 ELISA 等。可以用于动物、植 物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。
成分：
高效RIPA 裂解液的主要成分为 50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1% Triton X-100， 1% sodium deoxycholate，0.1% SDS，以及 sodium orthovanadate，sodium fluoride，EDTA， leupeptin 等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。
使用说明：
如发现 RIPA 有沉淀，请放室温半小时或者常温水浴使沉淀溶解。 根据使用量，取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF，使 PMSF 的最终浓度为 1mM，混匀备用（PMSF 现用现加）。
1、样品前处理：
a)对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍。按照 6 孔板每孔 细胞量加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接 触。
b)对于悬浮细胞：离心收集细胞，按照 6 孔板每孔细胞量加入 150-250uL 裂解液的比例加入 裂解液，用手指轻弹悬浮细胞以充分裂解。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量 较多，必需分装成 50-100 万细胞/管，然后再裂解。
c)对于组织样品：把组织剪切成细小的碎片。按照每 20mg 组织加入 150-250uL 裂解液的比 例加入裂解液(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品， 可以适当减少裂解液的用量) 。用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
2、后处理： 将裂解后的样品 10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的蛋白浓度测定、 SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作。
注意事项：
本试剂为强烈型裂解液，可以提取核蛋白，但在提取核蛋白的同时，也会将基因组一并释放 出来，若细胞量多会造成细胞裂解液粘稠：此时可以直接加入蛋白上样缓冲液，煮沸再离心， 离心后直接上样电泳；若想测定浓度，可加入少量 SDS（1%），煮沸后离心测浓度。本系列 蛋白提取试剂所提取的蛋白由于含有去污剂，所以不适合使用 Bradford 蛋白浓度测定试剂 盒，请选择 BCA 法或者 Lowry 法检测蛋白浓度。
如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散粘稠状物，随后 离心取上清用于后续实验