【检验方法】
全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2°C的条件下进行。首先根据样本量大小,分以下几种情况:
一、使用15ml离心管时:
情况A:血液样本量小于3ml时,实验方法如下:
1.取一支15ml离心管,加入3ml分离液。
2.用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,400-650g,离心20-30min(注:根据血液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件需客户自行摸索,以达到*分离效果)。
3.离心后,此时离心管中由上至下分为四层。*层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4.用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15ml离心管中,向所得离心管中加入10ml清洗液(产品编号:2010X1118),混匀细胞。
5.250g,离心10min。
6.弃上清。
7.用吸管以5ml清洗液(产品编号:2010X1118)重悬所得细胞。
8.250g,离心10min。
9.重复6、7、8,弃上清后以0.5ml后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况B:血液样本量为3-6ml时,实验方法如下:
1.取一支15ml离心管,先加入与血液样本等量的分离液。
2.用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,450-650g,离心20-30min(注:根据血液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件需客户自行摸索,以达到*分离效果,但*离心力*不超过1200g
)。
3.离心后,此时离心管中由上至下分为四层。*层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4.用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15ml离心管中,向所得离心管中加入10ml清洗液(产品编号:2010X1118),混匀细胞。
5.250g,离心10min。
6.弃上清。
7.用吸管以5ml清洗液(产品编号:2010X1118)重悬所得细胞。
8.250g,离心10min。
9.重复6、7、8,弃上清后以0.5ml后续实验所需相应液体重悬细胞。
二、使用50ml离心管时:
情况A:血液样本量为6-10ml时,实验方法如下:
1.取一支50ml离心管,先加入与血液样本等量的分离液。
2.用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,500-950g,离心20-30min(注:根据血液样本量确定离心条件,
血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件
需客户自行摸索,以达到*分离效果,但*离心力*不超过1200g)。
3.离心后,此时离心管中由上至下分为四层。*层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4.用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15ml离心管中,向所得离心管中加入10ml清洗液(产品编号:2010X1118),混匀细胞。
5.250g,离心10min。
6.弃上清。
7.用吸管以5ml清洗液(产品编号:2010X1118)重悬所得细胞。
8.250g,离心10min。
9.重复6、7、8,弃上清后以0.5ml后续实验所需相应液体重悬细胞。
情况B:血液样本量为10-20ml时,实验方法如下:
1.取一支50ml离心管,先加入与血液样本等量的分离液。
2.用吸管小心吸取血液样本加于分离液之液面上,50-1100g,离心20-30min(注:根据血液样本量确定离心条件,血液样本量越多,离心力越大,离心时间越长,具体离心条件需客户自行摸索,以达到*分离效果,但*离心力*不超过1200g)。
3.离心后,此时离心管中由上至下分为四层。*层为血浆层。第二层为环状乳白色淋巴细胞层。第三层为透明分离液层。第四层为红细胞层。
4.用吸管小心吸取第二层环状乳白色淋巴细胞层到另一15ml离心管中,向所得离心管中加入10ml清洗液(产品编号:2010X1118),混匀细胞。
5.250g,离心10min。
6.弃上清。
7.用吸管以5ml清洗液(产品编号:2010X1118)重悬所得细胞。
8.250g,离心10min。
9.重复6、7、8,弃上清后以0.5ml后续实验所需相应液体重悬细胞。