中文名:DMEM/F12培养基(干粉型)
英文名:DMEM-Ham's F12 50:50 Mixture (Dry powder)
货号:lvn1004-3
使用量:15.6G/L
规格: 10X1L/包、10L/包、50L/桶。
有效期: 36个月
主要成分:+Sodium Pyruvate、+L-Glutamine、+Phenol Red、+HEPES
产品简介:
DMEM/F-12是一种广泛用于支持许多不同哺乳动物细胞生长的基础培养基。在其中成
功培养的细胞包括MDCK、胶质细胞、纤维细胞、人内皮细胞和大鼠成纤维细胞。
产品描述:
本产品为粉末培养基,含 D-葡萄糖、谷氨酰胺、酚红、HEPES;粉末培养基需按说明
书进行溶解,经过滤除菌后保存使用。
使用说明
●准备与终体积接近的容器。
●准备常温蒸馏水(15℃~30℃)。
●准备1N NaOH和1N HCI 。
1、称取适量粉末添加至95%终体积的蒸馏水中进行搅拌溶解。
2、按照1.2g/L标准添加碳酸氢钠。
3、使用1N NaOH或1N HCI,调节PH低于工作值0.2~0.3,(建议工作PH范围7.0-7.4)。
4、定容至终体积,过滤前应保持容器密封。
5、使用0.2μm膜过滤到无菌容器中待用。
6、在室温(15℃-30℃)条件配置溶液。
质量控制规范:
测试项目* 检验标准
外观 类白色粉末
颗粒度 98%试样通过100目标准筛
pH 5.7 to 6.0
溶解度 无颗粒沉淀
干燥失重 ≤5%
渗透压 270-330 mOsm/kg
内毒素含量 ≤ 10 EU/mL
支原体检测 不得有支原体污染
细胞形态 细胞形态正常
干粉培养基的过滤配制
1 将 1 升量的干粉在 950ml 细胞培养级纯净水中完全溶解
2 加入 2 克碳酸氢钠,继续搅拌至完全溶解
3 用 1N 盐酸或 1N 氢氧化钠调整到要求的 pH,并将溶液体积调至1000ml
4 在超净台内用 0.22um 滤膜负压过滤
5 将培养基在 2~8℃避光保存
高压灭菌型的配制
1 将 1 升的高压灭菌型干粉在 900ml 细胞培养级纯净水中完全溶解
2 将溶液 pH 调至 4.0 并将溶液体积调至 960ml
3 在 121℃,15psi 高压消毒 5 分钟
4 将培养基迅速取出,避免过久加热引起成份分解或液体蒸发减少
5 待培养基冷却至室温后,无菌操作加入 29.3ml 的无菌 7.5%碳酸
氢钠溶液,及 10ml 的无菌 200mM L-谷氨酰胺
6 如有必要,用无菌的 1N 盐酸或 1N 氢氧化钠调整 pH
7 将培养基在 2~8℃避光保存
自备材料
细胞培养级或注射级纯水
7.5%碳酸氢钠溶液(无菌)
200mM 谷氨酰胺溶液(无菌)
1 N 盐酸溶液(无菌)
1 N 氢氧化钠溶液(无菌)
质检指标
形状:淡黄色均匀粉末(干粉),澄清透明(液体)
溶解:干粉按要求溶解后澄清透明
pH 值:(加碳酸氢钠前)4.4-5.0(加碳酸氢钠后)(液体)7.4-8.0
渗透压:(加碳酸氢钠前)230-270(加碳酸氢钠后)280-320 (液体)
菌落:每克小于 100cfu (干粉),无菌(液体)
细胞生长:正常(干粉及液体)