注意:下载说明书,签写实验备注发至邮箱:496415570@qq.com
描述:
Western Blot即蛋白质免疫印迹法,也称Western、Western blotting、Western印迹,常简写为WB,是将电泳分离后的细胞或组织总蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶转移到固相支持物PVDF或NC膜膜上,然后用特异性抗体检测某特定抗原的一种蛋白质检测技术,现已广泛应用于基因在蛋白水平的表达研究、抗体活性检测和疾病早期诊断等多个方面。
专业的技术团队,多年的Western Blot试剂盒研发经验,可以针对客户的不同需要设计不同的实验方案,提供最快捷优质的服务。
Western Blot基本原理:
Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)分离的蛋白质样品,通过转膜方式转移到固相载体(如PVDF、NC膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶标记(通常是HRP)的第二抗体起反应,经过底物化学发光试剂(如ECL)发光或显示试剂(如DAB)显色以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。
Western Blot检测技术服务客户须知:
客户需提供样品:新鲜或正确保存的组织、细胞或蛋白样品,组织样品:每份样品约250~500mg,10-15mg/ml;细胞样品:每份样品约1×106~1×107 细胞数,浓度>1μg/μl;蛋白样品:裂解样品总蛋白量>500μg/样品,浓度≥2μg/μl。
建议客户提供目的蛋白阳性对照。
若客户提供一抗,须为符合技术要求的浓缩或即用型一抗,也可由利维宁代购;若因客户抗体原因导致实验失败,由此造成的损失由客户承担。
客户提供待检测目的蛋白的详细信息,包括蛋白种属、大小、参考文献等。
运输要求:干冰
客户应对所提供的材料及信息负责,如因客户提供的材料及信息不准确而引起的实验延误或经济损失由客户承担。
因科学实验的不确定性,实验结果不一定会出现阳性结果,我们保证实验结果的真实准确性,但是对结果是否符合预期不做承诺。
Western Blot检测技术服务流程:
Western Blot检测技术服务承诺:
利维宁承诺提供高分辨率的清晰图片,准确、客观、可信的检测数据和分析结果:
化学发光成像图片,实验所剩样本及抗体(如有所剩余);
蛋白定量结果(Excel);
蛋白灰度值分析结果(Excel);
实验报告(包括详细实验步骤及WB结果相关的图表)
NO. | 方法 | 单价 |
1 | 蛋白提取 | 60元/样本 |
2 | BCA蛋白测定 | 20元/样本 |
3 | WB检测 | 1000元/张/膜 |
4 | 其他检测 | 咨询 |